Поляризационный контраст
Поляризованный свет применяется для выявления объектов с двойным лучепреломлением, которые становятся светлыми на темном поле (например минеральные включения).
Формы двулучепреломления
Если поместить гистологический препарат между скрещенными поляризаторами, то в срезе ткани можно обнаружить кристаллические участки, которые будут резко контрастными на фоне аморфного вещества. Данный метод широко используется при изучении костей, волос и зубов.
Контраст между крахмальными зернами и фоном или между кристаллами и некристаллическими участками в ткани возникает благодаря ориентации и особым свойствам кристаллов
Визуализация прозрачных препаратов путем контрастирования и их воздействию на свет. Светлые участки выглядят так потому, что находящиеся в них структуры имеют две основные оси с различными показателями преломления вдоль них. В зависимости от направления плоскости колебаний по отношению к этим осям свет ведет себя по-разному. Такие материалы называются двулучепреломляющими и анизотропными. Если поместить исследуемый препарат между скрещенными поляризаторами, то различие в контрасте между двулучепреломляющим и обычным веществом будет значительным. В некоторых случаях бывает полезно немного повращать поляризаторы друг относительно друга, чтобы сделать изотропные участки в препарате видимыми благодаря их поглощению. Такие препараты, как целлюлоза, крахмал, хлоропласты и волокна митотического веретена, имеют сложную структуру, которая дает по крайней мере две формы двулучепреломления. Помещенные между скрещенными поляризаторами, эти структуры будут давать при вращении двулучепреломление, которое определяется в той или иной степени их формой.
Направление двулучепреломления
Направление двулучепреломления можно определить с помощью компараторного кристалла, например чувствительной цветной пластинки. Использование кристалла весьма полезно также для достижения контраста между областями, в которых есть ориентированные оси с минимальным и максимальным показателями преломления, или между двулуче-преломляющими областями и аморфными структурами.
Пластинка Красная 1, будучи повернутой на 45° по отношению к скрещенным поляризаторам, дает красновато-розовое окрашивание фона. Это происходит потому, что плоскополяризованный белый свет, входя в пластинку, расщепляется на два луча, которые имеют два разных коэффициента преломления из-за ее двулучепреломления. При входе в анализатор оба луча вновь разделяются на две компоненты, и, проходя сквозь анализатор, компоненты каждого из лучей интерферируют друг с другом. Разность длин оптических путей (р. о. п.) двух лучей подбирается таким образом, чтобы амплитуда для зеленого света была сведена к нулю.
Окраска и яркость правильно установленного между скрещенными поляризаторами материала дает информацию о степени его кристалличности и об ориентации структур, либо ориентации внутри структур.
Во многих случаях плоскополяризованный свет может быть полезен для повышения контраста и уменьшения освещенности фона. Когда свет отражается от поверхностей, плоскость его колебаний изменяется так, что становится возможным отсечь блики, удаляя при помощи поляризатора колебания в новых направлениях. Недавно плоскополяризованный свет был применен для изучения иммуноцитохимических препаратов, окрашенных антителами, конъюгированными с золотом, с последующим усилением серебром. Один из исследователей, используя плоскополяризованный свет для изучения ряда образцов, окрашенных этим способом, обнаружил, что содержащие золото области имели зеленую плеохромную окраску
